产品基本信息
LbCas12a（又名Cpf1）核酸酶来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006 菌株。LbCas12a属于2类V型CRISPR效应蛋白，是一种依赖crRNA介导的核酸内切酶，在靶标双链DNA存在PAM（TTTV）序列的情况下，由crRNA介导特异性识别并切割双链DNA，而LbCas12a 特异性切割靶标单链DNA不依赖PAM序列。同时，LbCas12a-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA结合后，其非特异性ssDNA反式切割活性被激活，顺利获得设计两端标记荧光基团或其它小分子标记的单链Reporter DNA，可实现Cas12a对DNA模板的检测和信号放大。可顺利获得荧光仪和试纸条观察结果。
产品组分
| 组分 | EDE0005-100 | EDE0005-1000 | EDE0005-2000 |
| LbCas12a Nuclease | 1 μM*100 μL（100 pmol） | 1 μM*500 μL*2管（1000 pmol） | 1 μM*500 μL*4管（2000 pmol） |
| LbCas12a Cleavage Buffer（10×） | 500 μL*1管 | 1mL*4管 | 1mL*7管 |
反应体系
| 组分 | 终浓度 | 体积 ( μL) |
| 10× Cleavage Buffer | 1× | 3 |
| 1 μM LbCas12a Nuclease | 33 nM | 1 |
| 1 μM crRNA | 33 nM | 1 |
| 4 μM ssDNA Reporter | 400 nM | 3 |
| 100 nM DNA target | 3.3 nM | 1 |
| DEPC H2O | ||
| Total | 30 μL | 30 μL |
反应条件
使用实时荧光定量PCR仪或恒温扩增仪检测荧光信号，37℃反应，每30 sec采集一次荧光信号。
竞争性能交叉分析
横坐标为反应时间，纵坐标为 Bio-rad CFX96荧光PCR仪检测结果。由图可见，相同的条件下，可见本品切割效率显著高于同类产品。
Fig 1. Results of Cas12a collateral cleavage at different company product.
储存条件及有效期
有效期1年，保存条件-80°C。为避免反复冻融，Cas酶开封使用过后请置于-20°C；建议根据使用次数进行分装使用，避免温度多次变化导致酶活性降低。
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